نیوکلک ایسڈ نکالنے یا پیوریفیکیشن کٹ
Nucleic Acid Eنکالنا Or طہارت Kitیا -20℃ پر ذخیرہ کیا جاتا ہے۔ نمونے کو 0 ℃ کرلنگ کا استعمال کرتے ہوئے منتقل کیا جانا چاہئے۔
Introduction
نیوکلک ایسڈ نکالنے یا پیوریفیکیشن کٹ (مقناطیسی موتیوں کا طریقہ) خودکار نیوکلک ایسڈ نکالنے والے آلات کا استعمال کرتے ہوئے جسمانی رطوبتوں (جیسے جھاڑو، پلازما، سیرم) سے RNA اور DNA کی خودکار طور پر تطہیر کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے۔ میگنیٹک پارٹیکل ٹیکنالوجی اعلیٰ معیار کا DNA/RNA فراہم کرتی ہے جو کہ بہاوی ایپلی کیشنز جیسے ایمپلیفیکیشن یا دیگر انزیمیٹک رد عمل میں براہ راست استعمال کے لیے موزوں ہے۔
Application Range
پورے خون، پلازما، سیرم اور دیگر بافتوں کے نمونے براہ راست لیس اور ہضم کیے گئے تھے۔ جاری کردہ نیوکلک ایسڈ کو منتخب طور پر سپر پیرا میگنیٹک نینو میٹر مقناطیسی موتیوں کے ذریعے جذب کیا گیا تھا۔ پھر پروٹین، غیر نامیاتی نمک کے آئنوں اور نامیاتی نجاستوں کو واشنگ محلول کے ذریعے ہٹا دیا گیا۔ آخر میں، نیوکلک ایسڈ کو خالص نیوکلک ایسڈ محلول حاصل کرنے کے لیے ایلیونٹ کے ساتھ ایلوٹ کیا گیا۔
Kit Contents
بلی نہیں | YXN-VIRAL01-32A-BR | اجزاء | ||
-50A | - 100A | |||
سائز | 32 ٹیس | 50 ٹیسٹ | 100 ٹیسٹ | |
لیسس بفر | 96 well پری پیک ed پلیٹس 2 ٹکڑے | 25 ملی لیٹر | 50 ملی لیٹر | سرفیکٹنٹ اور ٹریس |
واش بفر I | ★15 ملی لیٹر | ★30ml | زیادہ نمک حل | |
بفر Il کو دھوئے۔ | ★6ml*2 | ★12ml*2 | کم نمک حل | |
ایلیوشن بفر | 10 ملی لیٹر | 20 ملی لیٹر | کم نمک حل | |
میگا بائیو ریجنٹ | 1.0 ملی لیٹر | 2.0 ملی لیٹر | مقناطیسی ذرات | |
ہینڈ بک(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Notes:کے لیےYXN-VIRAL01-32A-BR-50A،استعمال سے پہلے ★15mL واش بفر I میں 15mL مطلق ایتھنول شامل کریں۔ استعمال سے پہلے ★6mL واش بفر Il میں 24mL مطلق ایتھنول شامل کریں۔ | ||||
کے لیےYXN-VIRAL01-32A-BR-100Aاستعمال سے پہلے ★30mL واش بفر I میں 30mL مطلق ایتھنول شامل کریں۔ استعمال کرنے سے پہلے ★12mL واش بفر Il میں 48mL Absolute ethanol شامل کریں۔ |
Stسنتری Condآئی ٹی آئیons
کٹ کی آمد پر، کٹ کے اجزاء کو کمرے کے درجہ حرارت (15 − 25 ° C) پر ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔ ریجنٹس مینوفیکچرنگ کی تاریخ سے ایک سال تک مستحکم ہیں۔
Sample Requirements
1. قابل اطلاق نمونہ: جھاڑو، پلازما، سیرم اور سارا خون وغیرہ۔
2. نمونہ ذخیرہ اور نقل و حمل: نمونہ فوری طور پر ٹیسٹ کیا جانا چاہئے
Materials اور Devices Required but Not Provided
1. ڈسپوزایبل پاؤڈر فری دستانے
2. Biohazard کنٹینر
3. پنسل یا فی
Procedure
حیاتیاتی نیوکلک ایسڈ نکالنے والے آلے پر ایکسٹرکشن ری ایجنٹ کے آپریشن کے مراحل کی مختصر وضاحت کرنے کے لیے مندرجہ ذیل نمونے کی پٹی نکالنے والے سواب لوشن کو بطور مثال استعمال کرتا ہے۔Bioer NPA-32صیاSMآرٹ 32. دیگر نمونوں کی اقسام کے لیے، براہ کرم صارف دستی سے رجوع کریں۔ یہ تجرباتی حصول کے مطابق صارفین کے ذریعہ بھی چلایا جاسکتا ہے:
1. ریجنٹ تیاری
a کے لیےYXN-VB03-32A-50A اور YXN-VB03-32A-100A
2.2mL 96-deep-well پلیٹ کے کالم 1 اور 7 میں 500uL Lysis بفر، کالم 2 اور 8 میں 500uL واش بفر I، کالم 3، 4 اور 9,10 میں 500uL واش بفر II شامل کریں۔ کالم 5 اور 11 میں 70uL ایلیوشن بفر، 180uL خالص پانی اور کالم 6 اور 12 میں 20uL میگا بائیو ریجنٹ (استعمال سے پہلے مقناطیسی موتیوں کو اچھی طرح مکس کرنا چاہیے)،
ب کے لیےYXN-VB03-32A
کمرے کے درجہ حرارت پر 96 اچھی طرح سے پہلے سے پیک شدہ ری ایجنٹس رکھیں۔ 96 کنویں پلیٹ کو تین بار الٹا ہلائیں، اور پلاسٹک کے تھیلے کو پھاڑ دیں۔ پہلے سے پیک شدہ ری ایجنٹ کو چند سیکنڈ کے لیے سینٹری فیوج کریں (یا چند بار ہاتھ سے جھولیں) تاکہ ریجنٹ ٹیوبوں کی دیوار پر نہ لگے۔ 96 کنویں پلیٹ کی ایلومینیم فوائل فلم کو پھاڑ دیں اور پلیٹ کی سمت کی نشاندہی کریں (کالم #6 اور #12 میں مقناطیسی موتیوں کی مالا)،
2.نمونہ نکالنا
1. 96 ویل پلیٹ کالم #1 اور #7 میں 300uL نمونہ شامل کریں، براہ کرم کراس آلودگی سے بچیں،
2. آلے پر 96 گہری کنویں کی پلیٹ رکھیں، آلے پر 8-سٹرپ ٹپس لگائیں،
3. درج ذیل طریقہ کار کے مطابق پروگرام چلائیں،
4. خودکار صاف ہونے کے بعد، کالم 5 اور 11 میں ایلیوشن بفر کو ایک صاف اینٹی نیوکلیئر 0.5mL سینٹری فیوج ٹیوب میں منتقل کریں۔ اگر اسے فوری طور پر استعمال نہیں کررہے ہیں، تو براہ کرم -20 °C پر اسٹور کریں۔
Performance Characteristics
1. نکالی گئی مصنوعات کو 10 IU/mL کی حساسیت تک پہنچنے کے لیے اعلی حساسیت والے HBV DNA کا پتہ لگانے والے ری ایجنٹ کے ذریعے پتہ چلا ہے۔ 50 IU/mL کی حساسیت تک پہنچنے کے لیے نکالی گئی پروڈکٹ کو ہائی حساسیت والے HCV RNA کا پتہ لگانے والے ری ایجنٹ کے ذریعے پتہ چلا ہے۔
2. 4 نمونے منتخب کریں (سیرم/پلازما کا نمونہ، ناسوفرینجیل سویب کا نمونہ، سروائیکل ایکسفولیئٹ سیل نمونہ)، ہر نمونے کو 3 گریڈینٹ کے ساتھ 10 بار پتلا کیا جاتا ہے (بشمول اصل نمونہ کل 4 ارتکاز)، کوالیفائیڈ ریجنٹس اور ٹیسٹ ایجنٹس کا استعمال کرتے ہوئے اندرونی پتہ لگانے کے لیے مصنوعات کی ہدایات کے مطابق حوالہ جین، اور ہر بیچ کی Ct قدر 1 سے کم سے مختلف ہوتی ہے۔
سٹیp | ٹھیک ہے مقام | Prاوگرام نام | Waآئی ٹی آئیng Time(min:SS) | Mixing Time(mمیں:SS) | Magnet Time(min:SS) | Adsorption | Sپیشاب | Volume ٹیٹس (μL) | Temperature |
1 | 1 | Lyبہن | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Bایڈز | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wراکھ 1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wراکھ2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wراکھ3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Elution | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | رد کر دیں۔ | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL حفاظت
اس پروڈکٹ کو اس طریقے سے استعمال کرنے سے جو صارف کی دستاویزات میں متعین نہیں ہے اس کے نتیجے میں ذاتی چوٹ یا آلہ یا ڈیوائس کو نقصان پہنچ سکتا ہے۔ اس بات کو یقینی بنائیں کہ اس پروڈکٹ کو استعمال کرنے والے ہر شخص کو لیبارٹریوں کے لیے عام حفاظتی طریقوں اور اس دستاویز میں فراہم کردہ حفاظتی معلومات میں ہدایات موصول ہوئی ہیں۔
1.1 ایک آلہ یا آلہ استعمال کرنے سے پہلے، آلہ یا آلہ کے مینوفیکچرر کی طرف سے فراہم کردہ صارف کی دستاویزات میں فراہم کردہ حفاظتی معلومات کو پڑھیں اور سمجھیں۔
1.2 کیمیکل کو سنبھالنے سے پہلے، تمام قابل اطلاق حفاظتی ڈیٹا شیٹس (SDSs) کو پڑھیں اور سمجھیں اور مناسب ذاتی حفاظتی سامان (دستانے، گاؤن، آنکھوں کی حفاظت وغیرہ) کا استعمال کریں۔ SDSs حاصل کرنے کے لیے، اس دستاویز میں "دستاویزات اور معاونت" سیکشن دیکھیں۔
2. کیمیکل حفاظت
جنرل کیمیکل ہینڈلنگ۔ خطرات کو کم کرنے کے لیے، یقینی بنائیں کہ لیبارٹری کے اہلکار ذیل میں فراہم کردہ کیمیائی استعمال، ذخیرہ کرنے اور فضلے کے لیے عمومی حفاظتی ہدایات کو پڑھیں اور اس پر عمل کریں، اور مخصوص احتیاطی تدابیر اور ہدایات کے لیے متعلقہ SDS سے مشورہ کریں: کیمیکل کے ذریعے فراہم کردہ سیفٹی ڈیٹا شیٹس (SDSs) کو پڑھیں اور سمجھیں۔ مینوفیکچرر اس سے پہلے کہ آپ کسی کیمیکل یا خطرناک مواد کو ذخیرہ کریں، ہینڈل کریں یا ان کے ساتھ کام کریں۔
2.1 کیمیکلز سے رابطہ کم سے کم کریں۔ کیمیکلز کو سنبھالتے وقت مناسب ذاتی حفاظتی سامان پہنیں (مثال کے طور پر حفاظتی شیشے، دستانے، یا حفاظتی لباس)۔
2.2 کیمیکلز کی سانس کو کم سے کم کریں۔ کیمیائی کنٹینرز کو کھلا نہ چھوڑیں۔ صرف مناسب وینٹیلیشن کے ساتھ استعمال کریں (مثال کے طور پر، فیوم ہڈ)۔
2.3 کیمیائی رساو یا اسپل کے لیے باقاعدگی سے چیک کریں۔ اگر رساو یا اسپل ہوتا ہے تو، SDS میں تجویز کردہ مینوفیکچرر کے صفائی کے طریقہ کار پر عمل کریں۔
2.4 فوم ہڈ میں کیمیائی فضلہ کو ہینڈل کریں۔
2.5 بنیادی اور ثانوی کچرے کے کنٹینرز کے استعمال کو یقینی بنائیں۔ (ایک بنیادی فضلہ
کنٹینر فوری فضلہ رکھتا ہے. ایک ثانوی کنٹینر پرائمری کنٹینر سے پھیلنے یا لیک پر مشتمل ہوتا ہے۔ دونوں کنٹینرز کو فضلہ کے مواد کے ساتھ ہم آہنگ ہونا چاہیے اور کنٹینر ذخیرہ کرنے کے لیے وفاقی، ریاستی اور مقامی ضروریات کو پورا کرنا چاہیے۔)
2.6 کچرے کے برتن کو خالی کرنے کے بعد، فراہم کردہ ٹوپی کے ساتھ اسے سیل کریں۔
2.7 آپ کی لیبارٹری میں استعمال ہونے والے مخصوص ایپلی کیشنز، ری ایجنٹس اور سبسٹریٹس کے ذریعے پیدا ہونے والے فضلے کی خصوصیت (اگر ضروری ہو تو تجزیہ کریں)۔
2.8 اس بات کو یقینی بنائیں کہ فضلہ کو تمام مقامی، ریاستی/صوبائی، اور/یا قومی ضابطوں کے مطابق ذخیرہ، منتقل، نقل و حمل اور تلف کیا جاتا ہے۔
2.9 تابکار یا حیاتیاتی خطرناک مواد کو خصوصی ہینڈلنگ کی ضرورت ہو سکتی ہے، اور ضائع کرنے کی حدود لاگو ہو سکتی ہیں۔
3حیاتیاتی خطرہ حفاظت
ممکنہ حیاتیاتی خطرہ۔ اس آلے پر استعمال ہونے والے نمونوں پر منحصر ہے، سطح کو حیاتیاتی خطرہ سمجھا جا سکتا ہے۔ حیاتیاتی خطرات کے ساتھ کام کرتے وقت آلودگی سے پاک کرنے کے مناسب طریقے استعمال کریں۔
بایوہزارڈ حیاتیاتی نمونے جیسے ٹشوز، جسمانی رطوبتیں، متعدی ایجنٹ، اور انسانوں اور دیگر جانوروں کے خون میں متعدی بیماریوں کو منتقل کرنے کی صلاحیت ہوتی ہے۔ تمام قابل اطلاق مقامی، ریاستی/صوبائی، اور/یا قومی ضوابط پر عمل کریں۔ مناسب حفاظتی سامان پہنیں، جس میں شامل ہیں لیکن ان تک محدود نہیں: حفاظتی چشمہ، چہرے کی ڈھال، کپڑے/لیب کوٹ، اور دستانے۔ تمام کام مناسب حفاظتی آلات (مثال کے طور پر، جسمانی کنٹینمنٹ ڈیوائسز) کا استعمال کرتے ہوئے مناسب طریقے سے لیس سہولیات میں کئے جائیں۔ ممکنہ طور پر متعدی مواد کے ساتھ کام کرنے سے پہلے افراد کو قابل اطلاق ریگولیٹری اور کمپنی/ادارے کی ضروریات کے مطابق تربیت دی جانی چاہیے۔
درج ذیل میں قابل اطلاق رہنما خطوط اور/یا ریگولیٹری تقاضوں کو پڑھیں اور ان پر عمل کریں:
امریکہ میں: مائیکرو بائیولوجیکل اور بائیو میڈیکل لیبارٹریز میں بائیو سیفٹی میں شائع ہونے والے امریکی محکمہ صحت اور انسانی خدمات کے رہنما خطوط www.cdc.gov/biosafety پر پائے جاتے ہیں۔
پیشہ ورانہ حفاظت اور صحت کے معیارات، خون سے پیدا ہونے والے پیتھوجینز (29 CFR§1910.1030)، یہاں پائے گئے:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
ممکنہ طور پر متعدی مواد کے ساتھ کام کرنے/ان سے نمٹنے کے لیے آپ کی کمپنی/انسٹی ٹیوشن کے بائیو سیفٹی پروگرام پروٹوکولز۔ حیاتیاتی خطرہ کے رہنما خطوط کے بارے میں اضافی معلومات دستیاب ہے: www.cdc.gov۔
EU میں: بائیو ہارڈ اور بائیو سیفٹی احتیاط سے متعلق مقامی رہنما خطوط اور قانون سازی کی جانچ کریں اور ورلڈ ہیلتھ آرگنائزیشن (WHO) لیبارٹری بائیو سیفٹی مینوئل، تیسرے ایڈیشن میں شائع ہونے والے بہترین طریقوں کا حوالہ دیں: www.who.int/csr/resources/publications /biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/en/.